科学背景

鳞状细胞癌（SCC）细胞系是CRISPR功能基因组学研究中公认的"难转染"挑战。其特殊的膜脂质组成、高度激活的应激响应通路以及异常的内体转运机制，共同抑制了外源核酸的摄取与胞内释放。

传统非病毒转染试剂与病毒载体在此类细胞中均面临效率偏低、细胞毒性较高或两者兼有的困境，使大规模功能缺失研究难以稳定开展。

脂质纳米颗粒（LNP）技术已通过临床验证，是目前最成熟的非病毒核酸递送平台之一。LNP由可电离脂质、磷脂、胆固醇和PEG脂质组成，形成直径约100 nm的颗粒。其核心机制在于可电离脂质在内体酸性环境（pH~5.5）下发生电荷翻转，介导内体逃逸，将核酸释放至细胞质，这一步骤对mRNA翻译和sgRNA引导的Cas9活性至关重要。

应用案例：江苏省人民医院

机构简介

江苏省人民医院（南京医科大学第一附属医院）是国内排名前列的三级甲等综合性医院，也是重要的转化肿瘤学研究中心。该院对基因编辑工具的评估标准涵盖编辑效率、脱靶谱、细胞活力及生物学重复间的重现性。

实验设计

研究团队目标是在鳞癌细胞系中实现CRISPR/Cas9介导的靶基因敲除。经过与电转和传统脂质转染方案的平行对比评估，最终选定SDR8100 NeoLNP™ CRISPR基因编辑套装作为核心工具。

实验流程如下：

• 按照套装说明书，将Cas9 mRNA与合成sgRNA共包封于NeoLNP™颗粒中（简单混合操作，无需专用设备）。
• 在标准培养条件下，将LNP-核酸复合物直接施加至鳞癌细胞。
• 转染后48–72小时提取基因组DNA，通过T7E1核酸内切酶错配切割实验结合凝胶电泳与条带灰度定量分析，评估基因编辑效率。

实验结果

注：T7E1定量结果为Indel频率估算值，方法误差约±5%。如需精确等位基因分析，建议采用Sanger测序或二代测序（扩增子测序）。

作用机制：LNP为何能突破传统方法的瓶颈

SDR8100 NeoLNP™套装利用晟迪生物自主研发的可电离脂质配方，从根本上解决了SCC细胞递送的核心障碍：

• 内体逃逸：可电离脂质在内体酸性环境（pH~5.5）下转变为正电荷状态，破坏内体膜结构，在溶酶体降解发生前将Cas9 mRNA与sgRNA释放至细胞质。
• 大片段RNA共包封递送：Cas9 mRNA（~4.5 kb）与sgRNA（~100 nt）共同包封于同一LNP颗粒中，实现等摩尔比例递送至每个细胞，最大化Cas9–sgRNA核糖核蛋白（RNP）的有效组装概率。
• 瞬时表达特性：mRNA介导的Cas9表达在完成基因编辑后随mRNA自然降解而终止，核酸酶活性持续时间短，与质粒转染相比可降低脱靶编辑风险。
• 低免疫原性：Cas9 mRNA采用修饰核苷化学优化，可减少先天免疫识别（TLR3/7/8及MDA5通路激活），在保护细胞活力的同时提高编辑保真度。

晟迪生物基因编辑核心产品矩阵

作为脂质递送领域的技术创新企业，晟迪生物围绕LNP平台构建了覆盖体外转染、体内递送及基因编辑应用的完整产品体系。通过自主脂质材料研发与制备工艺优化，公司将高效递送技术系统化、标准化，显著提升核酸药物与编辑工具的应用效率。

NeoLNP™系列产品已在多种细胞系与动物模型中验证有效，支持mRNA、siRNA及质粒DNA递送，兼顾高转染效率与低细胞毒性。在基因编辑场景下，晟迪生物开发了专用共包封体系，实现Cas9 mRNA与sgRNA的协同递送，提高编辑效率并降低脱靶风险。

同时，公司提供高纯度、低免疫原性的Cas9 mRNA原料，采用修饰核苷优化与先进加帽技术，确保翻译效率与稳定性。产品规格覆盖研究级至GMP级，支持从基础研究到临床开发的连续推进。

1. NeoLNP™ 细胞/动物转染试剂 自主脂质材料研发，兼顾高效率与低毒性

• 细胞转染系列：
  • 常用细胞 RNA 转染试剂盒 SDR8006
  • 干细胞 RNA 转染试剂盒 SDR8008 —— 干细胞难转染？选它！
  • 免疫细胞系/原代免疫细胞 RNA 转染试剂盒 SDR2006/SDR2008 —— 攻克免疫细胞转染难关
• 体内递送系列：
  • RNA 系统转染/局部转染试剂盒 SDR8002/SDR8003
  • 肝脏靶向 RNA 转染试剂盒 SDR6002
  • 肺部靶向 RNA 转染试剂盒 SDR6005 —— 精准靶向，解决肝外递送难题

2. NeoLNP™ CRISPR 基因编辑套装 专用共包封体系，协同递送Cas9 mRNA与sgRNA

• 适用常用细胞 SDR8100 及免疫细胞系 SDR2100
• 优势： 编辑效率高，脱靶风险低，即用型液体操作简便

3. 高品质 Cas9 mRNA 原料

• 高纯度、低免疫原性： 采用修饰核苷优化与先进加帽技术
• 规格灵活： 液体 SDRL003 / 冻干粉 SDRP003 可选，覆盖50μg至1mg
• 合规支持： 提供研究级至GMP级，支持临床申报

广泛的应用场景

SDR8100 NeoLNP™套装及NeoLNP™平台系列产品为以下研究领域提供标准化、可重现的解决方案：

• 肿瘤靶点发现与功能基因组学筛查（包括实体瘤模型的池化CRISPR筛选）
• 原代细胞、干细胞及神经元细胞的CRISPR编辑（适用于病毒载体存在生物安全顾虑、或电转损伤细胞活力的场景）
• 多基因共递送与复杂基因调控网络解析
• 基因编辑治疗策略的临床前验证（IND使能研究前阶段）

合作模式与商业化支持

晟迪生物为各阶段的研究者与开发者提供全链条支持：

• 免费试用计划：符合条件的科研团队可申请免费评估样品，并享有专属应用科学家的一对一技术支持。
• 技术服务：定制化LNP配方开发、共包封工艺优化及针对特殊细胞类型的方案设计。
• 法规支持：协助DMF备案、提供质量体系文件，并为临床阶段项目提供GMP级原料供应。

下一期，我们将介绍LNP从核酸递送迈向功能蛋白递送的技术跨越，敬请关注!

NeoLNP™系列产品均提供免费试用服务

✓ 免费试用装   ✓ 1对1方案设计   ✓ 全程技术支持

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让基因编辑更高效

关于晟迪生物

晟迪生物专注于以自主创新的纳米载体技术为核心，推动RNA疗法及其他合成生物学技术的创新研究与临床转化。公司建立了人工智能与合理实证驱动的全链条LNP递送技术解决方案（TLS），拥有核心脂质材料库、NeoLNP™系列试剂盒（干细胞/免疫细胞/动物体内RNA转染）和RNA序列设计模型，并成功开发了以肺部雾化吸入、皮肤局部给药为代表的i-Core LNP™肝外靶向RNA递送方案。

— 明星产品 —

• 常用细胞转染：SDR8006 NeoLNP™ 常用细胞RNA转染试剂盒
• 干细胞转染：SDR8008 NeoLNP™ 干细胞RNA转染试剂盒
• 免疫细胞系转染：SDR2006 NeoLNP™ 免疫细胞系RNA转染试剂盒
• 原代免疫细胞转染：SDR2008 NeoLNP™ 原代免疫细胞RNA转染试剂盒
• 人原代T细胞转染：SDR9001 NeoLNP™ Ultra抗体偶联ctLNP试剂盒(人原代T细胞）
• 动物系统转染：SDR8002 in vivo NeoLNP™ RNA系统转染试剂盒
• 动物局部转染：SDR8003 in vivo NeoLNP™ RNA局部转染试剂盒
• 动物肝脏靶向：SDR6002 in vivo NeoLNP™ 肝脏靶向RNA转染试剂盒
• 动物肺部靶向：SDR6005 in vivo NeoLNP™ 肺部靶向RNA转染试剂盒